五種豬臨床常見病原體危害及其檢測方法研究

曹百榮 助理獸醫師

摘要：研究在介紹五種豬臨床常見病原體及其危害的基礎上，探討了這些豬病病原體的臨床檢測方法，以期為相關工作和研究者提供參考和借鑒。

關鍵詞：豬病病原體；危害；臨床診斷方法

1臨床常見豬病病原體的生理特性及其危害

1.1豬瘟病毒及其危害

豬瘟病又名豬霍亂病，是一種嚴重危害養豬業發展的一類豬烈性轉染性疾病，被我國列為豬一類傳染病。引起該病的病原菌為豬瘟病毒（CSFV），遺傳物質為單股正鏈RNA病毒，其病毒呈球形，具有囊膜結構。豬瘟病毒屬為黃病毒科的瘟病毒屬。通過流行性病學調查以及基因的序列分析，我國目前主要流行的是主基因2型豬瘟病毒，流行特點有較大的變化，其臨床癥狀難以與其他豬病區分。最重要的是此類豬瘟病毒是規模化養豬場的主要傳染源，會造成母豬的繁殖障礙以及所產仔豬的免疫耐受現象。

1.2豬圓環病毒及其危害

豬圓環病毒（PCV）發現於1974年，是一種新的病毒，屬於圓環病毒科圓環病毒屬。豬圓環病毒遺傳物質為單鏈環狀的DNA，其顆粒形狀呈二十面體對稱，無囊膜結構，是目前已知的最小的一種動物病毒。豬圓環病毒臨床癥狀稱為斷奶仔豬多系統衰竭綜合征（PMWS）。隨著科學研究的發展，人們對PCV的研究逐步深入。根據病毒基因序列和致病性、毒力，PCV可分為PCV-1和PCV-2兩個血清型[1]。目前，世界各國的學者一致確認，同一血清型的PCV基因序列相似度可達到90%以上，PCV-2為PMWS的主要病原體，即PCV-2存在致病性，PCV-1則無致病性。研究表明，PCV-2病毒既可以水平傳播，又可以垂直傳播，PCV-2感染可損害機體的免疫細胞，從而造成免疫力低下[2]。而且，PCV-2病毒還常和其它豬病原體引發混合感染和繼發疾病，引起的疾病在大範圍內的爆發和大流行，如豬瘟病毒、藍耳病毒、豬偽狂犬病毒等。

1.3豬藍耳病毒及其危害

豬藍耳病又稱豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS），是豬類疾病中最嚴重的一種。豬藍耳病於1987年在美國南部被發現，其病原菌PRRSV於1996年被我國學者郭寶清首次分離。豬藍耳病的主要臨床癥狀是引起成年母豬繁殖障礙和仔豬呼吸系統病變。PRRSV病毒呈球形，外有囊膜包裹，遺傳物質為單股正鏈的RNA。根據基因組序列的差異性，PRRSV病毒可分為兩個基因型，分別是北美洲型毒株和歐洲型毒株。目前，我國發病豬群有美洲型和歐洲型並存的態勢，給生豬養殖業造成了巨大的影響和損失。

1.4豬傳染性胃腸炎病毒及其危害

豬傳染性胃腸炎（TGE）一種高度接觸性的傳染病，主要由豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)引起。TGE首次爆發於1945年的美國，並於1956年傳染到我國大陸。TGEV病毒粒子呈多變性，有囊膜結構，遺傳物質為單股正鏈RNA，屬於冠狀病毒科、冠狀病毒屬。豬為TGEV的主要易感動物，感染後死亡率可達100%。PRCV的出現和快速傳播給養豬業的發展帶來了巨大的威脅。

1.5水皰性口炎病毒及其危害

水皰性口炎（VSV）首次發現於1801年的美國東部地區。水泡性口炎病毒的遺傳物質為單股負鏈RNA，增殖極為迅速，被國際獸疫局（OIE)列為法定報告的動物類疾病。水皰性口炎可感染動物多個部位，感染部位會出現水泡和潰瘍，臨床癥狀和口蹄疫極為相似。而且，水皰性口炎還可以通過被感染動物傳染人，引發人的疾病，因此被我國列為列為進境動物二類傳染病。從流行病角度分析，飛沫傳播、蚊蟲叮咬等是水皰性口炎的主要傳播途徑，且該病多呈季節性爆發，夏季至秋末為多發期。人在感染VSV後，會出現似於急性感冒的癥狀，在抵抗力弱的人群中，還可能出現病毒性腦炎的癥狀，如果得不到及時治療，將會引起激發的感染甚至死亡。

2臨床檢測診斷方法探討

2.1病原菌的分離培養

此方法是目前常用的臨床病原體檢測方法，具備很高的準確性。豬病病原菌一般包括病毒、細菌及支原體等，可選擇組織上清或者血清接種相應的敏感細胞進行培養，具體步驟如圖1所示。然而，病原菌的分離培養方法也有其缺陷，首先，耗時長；其次，有的細菌培養條件苛刻，一般實驗室難以達到相應的培養要求；第三，不能獨立進行準確的判斷和檢測，需其他檢測方法來輔助，很可能出現漏檢誤檢，耽誤疫病防治時間；第四，難以適應目前複雜多變的疫病形式，同時對多種病原體進行檢測。

圖1 豬病病毒性病原菌的分析培養步驟

2.2聚合酶鏈反應方法

此法特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時省力，在疫病的診斷廣泛應用。此法是一種通過體外酶促反應，從而合成特異的DNA片段的方法。多重PCR是在常規的PCR技術基礎上發展而來的，具有高效性和目的性，可實現對多種病原微生物的同時檢測，為臨床檢測提供更多、更準確、更快速的診斷信息。但是該技術無法徹底擺脫假陽性的問題。

2.3酶聯免疫吸附方法

此法目前應用技術相對成熟，具有很高的靈敏度，在疫病的檢測方面應用十分廣泛。其原理通常是將抗原固定在固相載體中，然後加入一級檢測抗體，形成一個抗原抗體的複合物形式。然而，此法無法區分自然感染或系疫苗接種所產生的抗體，容易發生誤識。

2.4環介導等溫擴增

環介導等溫擴增反應是一種新的基因診斷技術，是目前靈敏度就較高的檢測技術之一。環介導等溫擴增臨床使用不需要特殊的儀器，且操作十分簡單。但是該技術一個重大缺點在於假陽性問題比較嚴重，且該方法不能滿足現行混合疫病監測的需求。

2.5基因晶元技術

基因晶元技術又稱DNA晶元技術，具有高通量、高靈敏性、準確性、快速簡便的優點。但是晶元的信號有範圍的，會帶來相對的誤差，且成本較為高昂。

3結論

我國是個生豬養殖大國，生豬出欄率居世界第一。然而，近年來豬病感染向多種類型病原體混合感染和繼發感染的趨勢發展，不僅極大的影響並制約著我國的生豬養殖行業的發展，也對人類健康構成了巨大的威脅。對其危害及檢測方法的研究不僅對於豬病病原體的檢測具有較強的臨床實用價值，還有利於促進社會公共衛生安全，推進人類健康穩定可持續發展。

參考文獻

[1]殷震，劉景華.動物病毒學[M].第2版.北京:科學出版社,1997.

[2]周繼勇,陳慶新,葉菊秀等.豬圓環病毒2型感染的血清學分析[J].中國獸醫學報,2004,24(1):1-3.