蛋白質通常需要通過構象變化來「工作」,然而現有對活細胞蛋白構象變化追蹤的工具仍欠缺,並且很多時候對系統干擾大,或者擴展性不強(1, 2)。
北卡羅來納大學教堂山分校Klaus Hahn以及Timothy Elston等研究人員就開發了擴展性強對系統干擾小的新系統在活細胞研究蛋白質構象變化(2)。
該系統的核心想法是在目標蛋白質隨構象暴露-隱藏的位置加入一個小的標籤(文中用的只有7個氨基酸),這個小標籤可以特異性與加熒光標記的報道蛋白結合,從而將蛋白質構象變化轉化為熒光信號。研究人員進一步結合FRET提高該系統特異性,並研究了一種激酶(Src)時空活性動態變化(2)。
活細胞追蹤蛋白質活性變化(2)
結合FRET進一步提高系統特異性(2)
研究人員認為這種系統可以通過靈活調整研究之前無法操作的活細胞蛋白構象變化問題(2)。
該項工作2021年10月11日發表在Cell(2)。
Comments:
標籤比較小,擴展性比較強是重要優點;不過這個系統對報告蛋白表達量要求非常高,並且對「標籤」的插入位置非常有講究,需要非常細緻的優化才可能達到理想的效果
https://www.cell.com/cell/fulltext/S0092-8674(21)01109-0
通訊作者簡介:
https://www.med.unc.edu/pharm/directory/klaus-m-hahn-phd/
https://www.med.unc.edu/pharm/directory/timothy-elston/
參考文獻:
1. J.-E. EA, J. TM, FRET imaging. Nat.Biotechnol. 21, 1387–1395 (2003).
2. B. Liu et al., Biosensors based on peptide exposure show single molecule conformations in live cells. Cell.0 (2021), doi:10.1016/J.CELL.2021.09.026.
原文鏈接:
https://www.cell.com/cell/fulltext/S0092-8674(21)01109-0