「罗工秘籍」如何确定一些陌生荧光素,在流式细胞仪上是否可用?

2022年06月28日12:55:08 科学 1728

在多色流式实验设计时,荧光素的选择很重要。但我们发现流式仪器的标记荧光名称或厂家提供的检测说明书上写的荧光素并不那么全面。因为品牌的原材料不同,专利限制和荧光素研发等因素影响,我们经常会遇到很多陌生的荧光素名称,那如何去判断,我们自己的流式仪能不能检测这些荧光呢?

我们先来了解下荧光素特性,两个特征光谱(nm):

①激发光谱(Excitation,Ex):是指能特异性地激发某种荧光素的一定波长范围内的光线,也称为吸收光谱。最大吸收波长,也就是吸收波峰,简称Ex-Max。

发射光谱(Emission,Em):是指某一波长激发光引起荧光素发射的一定波长范围内的荧光。最大发射波长,即发射波峰,简称Em-Max。


「罗工秘籍」如何确定一些陌生荧光素,在流式细胞仪上是否可用? - 天天要闻


再来了解下常规流式仪,检测荧光素的原理:

流式细胞仪的光学系统中,配备了不同的激光器滤光片,用来激发和收集不同的荧光素信号。

①激光器:用来给荧光素,提供激发能量。常见的激发光有紫色Violet(405nm),蓝色Blue(488nm),绿色Green(561nm),红色Red(633nm),高配仪器还有紫外光UV(345nm),用来激发荧光素。

②滤光片:又可以分为长通、短通和带通,用来收集不同范围的发射波长,也就是能够检测不同的荧光素的发射信号,滤光片的设置主要是针对发生光谱中的发射波峰进行设置的。


因此,我们平常说配色,需要提供流式细胞仪荧光配置,是要有具体的激发器和滤光片的2个信息,才能判断具体能够检测的荧光通道。

下图为例,是405nm激光器下安装的滤光片以及能够检测的荧光素:

「罗工秘籍」如何确定一些陌生荧光素,在流式细胞仪上是否可用? - 天天要闻


但我们发现,405nm激光器下常用的的荧光素,比如BV系列的荧光素,在流式机器上并没有注明,那配色的时候到底还能不能用BV的染料?下面给大家介绍一种确认的方法:

「罗工秘籍」如何确定一些陌生荧光素,在流式细胞仪上是否可用? - 天天要闻


我们可以利用BD官方网站的“荧光光谱查看器”(https://www.bdbiosciences.com/zh-cn/resources/bd-spectrum-viewer),来查看其荧光素的激发波长以及滤光片的信息。


如上图,只要是荧光素激发波长和发射波长相近,能够被激发器激发,并能够在滤光片接收波长范围内,就都可以检测得到。就比如BV421,其实是可以用V450 or Pacific Blue这个通道检测的。


觉得这个比较复杂的话,或者手机端更方便时,还可以通过我们“流式专家”的微信公众号中的荧光光谱查看器进行查询。


「罗工秘籍」如何确定一些陌生荧光素,在流式细胞仪上是否可用? - 天天要闻

「罗工秘籍」如何确定一些陌生荧光素,在流式细胞仪上是否可用? - 天天要闻

「罗工秘籍」如何确定一些陌生荧光素,在流式细胞仪上是否可用? - 天天要闻


千万不要因为名字不熟悉,而错过很多,又亮,性价比又高的荧光素哦!


BD Sirigen系列专利荧光素:BB系列、BUV系列、BV系列、APC-R700, R718,更亮、更稳定、更准确。

「罗工秘籍」如何确定一些陌生荧光素,在流式细胞仪上是否可用? - 天天要闻

科学分类资讯推荐

“软黄金”冬虫夏草,你真的了解吗? - 天天要闻

“软黄金”冬虫夏草,你真的了解吗?

冬虫夏草千年传承的滋补良药采药人的寻觅自公元780年起冬虫夏草便以其独特的药用价值被载入史册从《藏本草》到《中国药典》均有记载李时珍更将其誉为“人身不老药”赞其兼具虫之阳刚与草之阴柔成为中药中独一无二的“阴阳同补”圣品享有“东方圣草”“药中
【链博传奇】中国中车:塑轨道之“链”,与世界同行 - 天天要闻

【链博传奇】中国中车:塑轨道之“链”,与世界同行

中国中车集团有限公司(以下简称“中国中车”)是中国轨道交通装备领域的“链”主企业,是全球规模领先、品种齐全、技术一流的高端装备制造商和系统解决方案提供商,清洁能源装备骨干企业。当前,中国中车搭建了世界领先的轨道交通装备产品技术研发平台,构建了完整的轨道交通装备产业体系,开创了轨道交通装备和清洁能源装...
全国AI精英宜宾对决 长江首城创新大赛点燃人工智能新引擎 - 天天要闻

全国AI精英宜宾对决 长江首城创新大赛点燃人工智能新引擎

中新网四川新闻7月11日电(吴平华 杨锦 )智汇长江首城,共享成长价值,10日,由宜宾市科学技术局、宜宾市数据局、宜宾市高铁南片区开发建设指挥部办公室联合主办,北京中关村信息谷资产管理有限责任公司承办的“长江首城宜创汇”协同创新大赛人工智能
地质队日记:塔克拉玛干腹地,沙丘下出现巨大的圆形结构 - 天天要闻

地质队日记:塔克拉玛干腹地,沙丘下出现巨大的圆形结构

记录人:刘哲,西部油气地质勘查第六分队 / 塔里木盆地沙地浅层剖面组成员时间:2023年5月10日地点:塔克拉玛干沙漠腹地,库车–民丰剖面中段那是一次平常不过的地震波剖面测线任务,我们团队负责在塔克拉玛干腹地沿一条南北走向布点,配合卫星图像
电机基础标准:GB/T 14711 标准状态及修订情况 - 天天要闻

电机基础标准:GB/T 14711 标准状态及修订情况

在电气设备领域,中小型旋转电机作为工业生产、日常生活等场景的重要动力设备,其安全性能至关重要。随着电机制造技术的飞速发展,新材料、新工艺不断应用于电机生产;同时,电机的应用场景也日益多样化,在新能源、智能制造等新兴领域的需求持续增长。
月球内部“异常贫瘠”?嫦娥六号月球背面岩石有望揭示谜底 - 天天要闻

月球内部“异常贫瘠”?嫦娥六号月球背面岩石有望揭示谜底

月球正反面为何大不同?月球演化都有哪些关键谜题?国际学术期刊《自然》日前正式发表了中国嫦娥六号月球背面采样任务的又一重大科学成果。该成果为全面了解月球早期的壳-幔演化历史提供了关键信息。该成果由中国科学院国家天文台和中国科学院地质与地球物理研究所共同完成。科研团队对嫦娥六号从月球背面南极-艾特肯盆地带...