在多色流式實驗設計時，熒光素的選擇很重要。但我們發現流式儀器的標記熒光名稱或廠家提供的檢測說明書上寫的熒光素並不那麼全面。因為品牌的原材料不同，專利限制和熒光素研發等因素影響，我們經常會遇到很多陌生的熒光素名稱，那如何去判斷，我們自己的流式儀能不能檢測這些熒光呢？
我們先來了解下熒光素特性，兩個特徵光譜（nm）：
①激發光譜（Excitation，Ex）：是指能特異性地激發某種熒光素的一定波長範圍內的光線，也稱為吸收光譜。最大吸收波長，也就是吸收波峰，簡稱Ex-Max。
②發射光譜（Emission，Em）：是指某一波長激發光引起熒光素髮射的一定波長範圍內的熒光。最大發射波長，即發射波峰，簡稱Em-Max。
再來了解下常規流式儀，檢測熒光素的原理：
流式細胞儀的光學系統中，配備了不同的激光器和濾光片，用來激發和收集不同的熒光素信號。
①激光器：用來給熒光素，提供激發能量。常見的激發光有紫色Violet（405nm），藍色Blue（488nm），綠色Green（561nm），紅色Red（633nm），高配儀器還有紫外光UV（345nm），用來激發熒光素。
②濾光片：又可以分為長通、短通和帶通，用來收集不同範圍的發射波長，也就是能夠檢測不同的熒光素的發射信號，濾光片的設置主要是針對發生光譜中的發射波峰進行設置的。
因此，我們平常說配色，需要提供流式細胞儀熒光配置，是要有具體的激發器和濾光片的2個信息，才能判斷具體能夠檢測的熒光通道。
下圖為例，是405nm激光器下安裝的濾光片以及能夠檢測的熒光素：
但我們發現，405nm激光器下常用的的熒光素，比如BV系列的熒光素，在流式機器上並沒有註明，那配色的時候到底還能不能用BV的染料？下面給大家介紹一種確認的方法：
我們可以利用BD官方網站的「熒光光譜查看器」（https://www.bdbiosciences.com/zh-cn/resources/bd-spectrum-viewer），來查看其熒光素的激發波長以及濾光片的信息。
如上圖，只要是熒光素激發波長和發射波長相近，能夠被激發器激發，並能夠在濾光片接收波長範圍內，就都可以檢測得到。就比如BV421，其實是可以用V450 or Pacific Blue這個通道檢測的。
覺得這個比較複雜的話，或者手機端更方便時，還可以通過我們「流式專家」的微信公眾號中的熒光光譜查看器進行查詢。
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