「羅工秘籍」如何確定一些陌生熒光素,在流式細胞儀上是否可用?

2022年06月28日12:55:08 科學 1728

在多色流式實驗設計時,熒光素的選擇很重要。但我們發現流式儀器的標記熒光名稱或廠家提供的檢測說明書上寫的熒光素並不那麼全面。因為品牌的原材料不同,專利限制和熒光素研發等因素影響,我們經常會遇到很多陌生的熒光素名稱,那如何去判斷,我們自己的流式儀能不能檢測這些熒光呢?

我們先來了解下熒光素特性,兩個特徵光譜(nm):

①激發光譜(Excitation,Ex):是指能特異性地激發某種熒光素的一定波長範圍內的光線,也稱為吸收光譜。最大吸收波長,也就是吸收波峰,簡稱Ex-Max。

發射光譜(Emission,Em):是指某一波長激發光引起熒光素髮射的一定波長範圍內的熒光。最大發射波長,即發射波峰,簡稱Em-Max。


「羅工秘籍」如何確定一些陌生熒光素,在流式細胞儀上是否可用? - 天天要聞


再來了解下常規流式儀,檢測熒光素的原理:

流式細胞儀的光學系統中,配備了不同的激光器濾光片,用來激發和收集不同的熒光素信號。

①激光器:用來給熒光素,提供激發能量。常見的激發光有紫色Violet(405nm),藍色Blue(488nm),綠色Green(561nm),紅色Red(633nm),高配儀器還有紫外光UV(345nm),用來激發熒光素。

②濾光片:又可以分為長通、短通和帶通,用來收集不同範圍的發射波長,也就是能夠檢測不同的熒光素的發射信號,濾光片的設置主要是針對發生光譜中的發射波峰進行設置的。


因此,我們平常說配色,需要提供流式細胞儀熒光配置,是要有具體的激發器和濾光片的2個信息,才能判斷具體能夠檢測的熒光通道。

下圖為例,是405nm激光器下安裝的濾光片以及能夠檢測的熒光素:

「羅工秘籍」如何確定一些陌生熒光素,在流式細胞儀上是否可用? - 天天要聞


但我們發現,405nm激光器下常用的的熒光素,比如BV系列的熒光素,在流式機器上並沒有註明,那配色的時候到底還能不能用BV的染料?下面給大家介紹一種確認的方法:

「羅工秘籍」如何確定一些陌生熒光素,在流式細胞儀上是否可用? - 天天要聞


我們可以利用BD官方網站的“熒光光譜查看器”(https://www.bdbiosciences.com/zh-cn/resources/bd-spectrum-viewer),來查看其熒光素的激發波長以及濾光片的信息。


如上圖,只要是熒光素激發波長和發射波長相近,能夠被激發器激發,並能夠在濾光片接收波長範圍內,就都可以檢測得到。就比如BV421,其實是可以用V450 or Pacific Blue這個通道檢測的。


覺得這個比較複雜的話,或者手機端更方便時,還可以通過我們“流式專家”的微信公眾號中的熒光光譜查看器進行查詢。


「羅工秘籍」如何確定一些陌生熒光素,在流式細胞儀上是否可用? - 天天要聞

「羅工秘籍」如何確定一些陌生熒光素,在流式細胞儀上是否可用? - 天天要聞

「羅工秘籍」如何確定一些陌生熒光素,在流式細胞儀上是否可用? - 天天要聞


千萬不要因為名字不熟悉,而錯過很多,又亮,性價比又高的熒光素哦!


BD Sirigen系列專利熒光素:BB系列、BUV系列、BV系列、APC-R700, R718,更亮、更穩定、更準確。

「羅工秘籍」如何確定一些陌生熒光素,在流式細胞儀上是否可用? - 天天要聞

科學分類資訊推薦

時速 600公里、貼地飛行,我國超導電動高速磁浮列車首次亮相! - 天天要聞

時速 600公里、貼地飛行,我國超導電動高速磁浮列車首次亮相!

每經編輯:杜宇據央視新聞,第十二屆世界高速鐵路大會正在北京舉行,時速達600公里超導電動高速磁浮列車也在本次大會首次亮相。圖片來源:央視新聞中車長客股份公司高級工程師介紹:超導電動高速磁浮是通過車載超導磁體與軌道上的線圈相互作用,實現列車與
認識2種丁酸衍生物 - 天天要聞

認識2種丁酸衍生物

丁酸鈉與三丁酸甘油酯作為丁酸的衍生物,在動物消化道中被分解成丁酸和其他物質。他們的主要生物學功能來源於丁酸。腸道上皮細胞優先選用丁酸作為能量源。作為一種短鏈脂肪酸,丁酸在進入小腸後部分以非離子形式被腸道黏膜細胞吸走,直接為腸黏膜細胞生長和增
米東區:這一電化學儲能電站項目推進中 - 天天要聞

米東區:這一電化學儲能電站項目推進中

(米東區融媒體中心記者:黃鵬報道)7月9日,記者在位於米東區北部沙漠東北部的新疆華電烏魯木齊光伏基地100萬千瓦/400萬千瓦時獨立新型儲能示範項目現場看到,工作人員正在對設備進行吊裝調試。該項目總投資約30億元,是全國單體容量最大的電化學
腦圖譜大科學計劃時機已來!中國科學家十項成果給大腦繪高清地圖 - 天天要聞

腦圖譜大科學計劃時機已來!中國科學家十項成果給大腦繪高清地圖

人類大腦是一個非常複雜的組織,要理解大腦的工作原理首先要了解其中的細胞種類和神經聯接規律,近日中國科學家聯合發布系列成果給大腦繪製“高清地圖”。 7月10日深夜,中國科學家聯合發布介觀腦圖譜系列成果,實現從嚙齒類到靈長類大腦的跨越。10項成果以專題論文集的形式集中發表在國際學術期刊《細胞》《神經元》《發育...
國際突破!中大培育光子“雙胞胎”,輻射強度達單光子水平 - 天天要聞

國際突破!中大培育光子“雙胞胎”,輻射強度達單光子水平

7月9日,《自然》雜誌(Nature)在線發表中山大學物理學院王雪華、劉進教授團隊主導的最新研究成果。該團隊提出了一種全新的腔誘導自發雙光子輻射方案,在國際上率先實現與單光子輻射強度相當的自發雙光子輻射,研發出保真度高達99.4%的按需觸發
微型肝臟,是未來希望,還是科技烏托邦 - 天天要聞

微型肝臟,是未來希望,還是科技烏托邦

文︱陸棄隨着全球器官移植需求持續攀升,傳統器官捐獻嚴重不足的問題愈發凸顯。美國初創企業LyGenesis推出了一個令人振奮的創新方案:通過將供體肝細胞注射至患者體內淋巴結中培育“微型肝臟”,嘗試在患者自身體內製造可替代肝臟功能的器官。
“軟黃金”冬蟲夏草,你真的了解嗎? - 天天要聞

“軟黃金”冬蟲夏草,你真的了解嗎?

冬蟲夏草千年傳承的滋補良藥採藥人的尋覓自公元780年起冬蟲夏草便以其獨特的藥用價值被載入史冊從《藏本草》到《中國藥典》均有記載李時珍更將其譽為“人身不老葯”贊其兼具蟲之陽剛與草之陰柔成為中藥中獨一無二的“陰陽同補”聖品享有“東方聖草”“葯中
【鏈博傳奇】中國中車:塑軌道之“鏈”,與世界同行 - 天天要聞

【鏈博傳奇】中國中車:塑軌道之“鏈”,與世界同行

中國中車集團有限公司(以下簡稱“中國中車”)是中國軌道交通裝備領域的“鏈”主企業,是全球規模領先、品種齊全、技術一流的高端裝備製造商和系統解決方案提供商,清潔能源裝備骨幹企業。當前,中國中車搭建了世界領先的軌道交通裝備產品技術研發平台,構建了完整的軌道交通裝備產業體系,開創了軌道交通裝備和清潔能源裝...