一種快速高效解決細胞支原體污染的辦法

細胞支原體污染你了解多少?

現如今,從生物石油到藥品、醫療等各方各面,均與生命科學息息相關。而細胞培養是當前整個生命科學研究中最基本的實驗技術。幹細胞生物學和疫苗研發等領域的發展及其應用在很大程度上是基於細胞培養技術的發展。

細胞培養是將組織或原代外植塊的細胞分散開來,使呈細胞懸液,然後將其培養於固體基質上貼壁生長,或使其在培養基中懸浮生長。

細胞株是生命科學研究的重要材料,而零污染的細胞株更是獲得可靠實驗數據的前提。

細胞株的微生物污染源一般有細菌、真菌、支原體。而其中支原體污染率竟高達30%~60%。支原體污染如此普遍的部分原因在於,即使在常規傳代培養中,其也能有效地傳播。


一、什麼是支原體

支原體又稱霉形體,直徑在0.1-0.3μm,是目前發現的最小的、最簡單的原核生物。支原體可以輕鬆地通過濾膜,混入培養系統中,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分支狀等多種形態。通常依附在細胞膜表面,支原體沒有剛性的細胞壁,因此普通的抗生素對它無效。

實驗室常見的種類有:口腔支原體、豬鼻支原體、發酵支原體、人型支原體、唾液支原體、肺支原體和梨支原體等。

二、受支原體污染後果

細胞株一旦感染支原體後,培養基通常不會有顏色變化。支原體附着在細胞株表面,通過搶奪細胞培養基中的養分實現增殖。在其繁殖的過程中除了消耗培養基中的各種養分,同時還會改變培養基中的pH值,甚至產生對細胞株有毒害的代謝產物,從而導致細胞狀態的改變。

支原體污染後雖然不會致使細胞株馬上死亡,但會影響細胞內的各種參數,如改變細胞膜抗原性、細胞新陳代謝、干擾核酸的合成、改變 DNA 轉染效率,導致染色體畸變等,在多方面產生深遠的影響,嚴重影響培養細胞各項參數的準確度。


三、支原體污染來源

支原體污染的潛在途徑包括:

· 受污染的培養基、試劑或儀器,包括了無菌試劑和材料、層流超凈工作台、恆溫恆濕培養箱、水浴鍋和冰箱等。

· 實驗室人員(約 80.6 %的技術人員為支原體攜帶者)

· 其他實驗室的被感染培養物

實驗室培養條下被多種支原體同時污染的情況屢見不鮮,這是一個讓大多數實驗室都十分頭痛的問題。保持無菌狀態,無論對於新手亦或是老手,都是一個巨大的挑戰。體外培養的細胞缺乏免疫系統,因此,控制污染的方式是預防污染!

細胞實驗室傳統的消毒流程是:
1. 用消毒酒精擦拭檯面;

2. 打開超凈工作台和細胞房的紫外燈,照射1~2h。

值得注意的是,紫外燈開啟後,人不能進入實驗室內,紫外線對眼睛和裸露的皮膚均有危害。若要進入,操作人員一定要先關閉紫外燈,待人離開後再重新打開。

細胞支原體污染解決方案

相比之下,潤聯旗下的高端智能化消毒設備歐菲姆操作簡單、設備體積小、重量輕,通電後即開即用,隨時啟停,消毒者可在實驗室外可遠程控制,完成整個消毒過程,從而避免在正常時間及突髮狀況下,操作人員為關閉設備而暴露在消毒過程中。

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